(Dinamica fluidelor)
SCHIMBAREA PARAMETRILOR DE GAZ CÂND TRECU PENTRU UN SARITUR DE SIGLAREA DIRECTĂ
Să stabilim o legătură între vitezele curgerii înainte de șoc și în spatele șocului. În acest scop, să rescriem ecuația forței aeriene (vezi § 10.7) sub forma R2 R și і - și2 ~ (10.64) p2 și 2 PB Ecuațiile lui Bernoulli (10.15) și (10.24), aplicate înainte și după săritură, dau ...(Dinamica fluidelor)
Transformarea revoluționară și Marele Salt înainte
Revoluția chineză împotriva capitalului străin și birocratic a durat 25 de ani, din 1924 până în 1949, și a constat din trei războaie civile și un război de eliberare națională împotriva Japoniei. S-a încheiat cu proclamarea Republicii Populare Chineze în 1949. Timp de 25 de ani, armata nu s-a oprit în China...(Istoria economică)
Panouri de perete și acoperiș „Sandwich”
Panourile sandwich sunt un material de construcție eficient. Sandvișuri se obișnuiește să se numească structuri de construcție sub formă de elemente multistrat ușoare care combină calități ridicate de izolare termică cu alte proprietăți caracteristice structurilor de închidere (rezistență mecanică, ...(Bazele proiectării întreprinderilor din industria uşoară)
MODIFICARE TESTURĂ IN
Metode de modificare a materialelor textile Omenirea a căutat întotdeauna să găsească modalități de a menține și menține sănătatea corpului său. Starea pielii este de mare importanță pentru bunăstare. Prin urmare, de mult timp, s-a acordat o atenție sporită materialelor textile, ...Metode de modificare a materialelor textile
Omenirea a căutat întotdeauna să găsească modalități de a menține și menține sănătatea corpului său. Starea pielii este de mare importanță pentru bunăstare. Prin urmare, pentru o lungă perioadă de timp, s-a acordat o atenție sporită materialelor textile, deoarece acestea intră constant în contact cu pielea umană ...(Efect de adaptare asupra corpului țesutului de semințe de in)
Mai devreme am scris despre un astfel de instrument pentru comunicarea costului mărfurilor către client ca. Acest articol va lua în considerare un instrument la fel de eficient numit metoda sandwich. Apropo, această metodă poate fi folosită atunci când se comunică orice informație negativă către client.
Efectul de primat și efectul fără prescripție medicală
Într-un monolog lung, creierul uman își amintește cel mai bine doar primele și ultimele cuvinte. Ceea ce a fost la mijloc și s-a spus între ele, se va auzi și el, dar cel mai probabil clientul se va gândi la ultima frază și apoi își va aminti prima.
Prima frază ar trebui să ofere clientului ceva la care să se gândească și să distragă puțin atenția de la textul următor, acesta se numește efectul de primație. Nu degeaba oamenilor din Rusia le place să spună atât de mult încât sunt întâmpinați de hainele lor. Ultima frază ar trebui, de asemenea, să ofere clientului un motiv de reflecție și să-și îndepărteze gândurile de ceea ce a fost spus mai devreme.
Exemplu de metoda sandwich
Client - cât costă această mașină?
Vânzător - cu interior din piele, prețul va fi de 20.000 USD. acest pachet include și un sistem audio fi-hi.
În acest caz, clientul își va aminti interiorul din piele și sistemul audio. Desigur, nu ar fi trebuit să-i vorbiți anterior despre aceste beneficii ale produsului. De asemenea, este important ca beneficiile să fie suficient de semnificative, dar, în același timp, nu ar trebui să mergi mult în lateral. Acest lucru poate fi perceput ca evitând răspunsul și provocând negativitate și vigilență. Mai degrabă, ar trebui să articulezi beneficiile ca la mijloc.
Metoda sandwich funcționează excelent pentru a preveni posibilul și accelerează semnificativ procesul. Astfel de lucruri mici sunt adesea subestimate de vânzători, deoarece par nesemnificative și nu există niciun beneficiu direct în ele. Dar acestea sunt micile lucruri care compun munca celor mai eficienți vânzători.
ARTICOL FARMACOPEAN GENERAL
Introdus pentru prima dată
Această monografie a farmacopeei generale se aplică metodei testului imunosorbent legat de enzime (ELISA). Metoda ELISA este o metodă de imunodiagnostic extrem de sensibilă și foarte specifică, cu ajutorul căreia se realizează o determinare calitativă și cantitativă a diferitelor substanțe cu proprietățile unui antigen, a unei haptene (antigen defectuos) sau a unui anticorp. Metoda ELISA este utilizată pe scară largă pentru diagnosticarea bolilor infecțioase și neinfecțioase la oameni și animale și poate fi folosită și pentru a confirma calitatea medicamentelor imunobiologice (IPM).
Principiul metodei constă în reacția unei interacțiuni specifice a unui antigen cu un anticorp cu formarea unui complex imun și detectarea ulterioară a complexului rezultat folosind spectrofotometrie, chemiluminiscență și alte tehnici adecvate. Detectarea poate fi fie directă (când substanța de testat în sine are activitate enzimatică sau este marcată cu o etichetă enzimatică), fie indirectă sau indirectă (când substanța de testat, care s-a legat de anticorpi imobilizați pe o fază solidă, este incubată cu anticorpi). marcat cu o enzimă). Analiza calitativă vă permite să obțineți informații despre conținutul de antigen sau anticorp din materialul de testat pe baza „este /” nu”. Când se efectuează o analiză cantitativă, concentrația de antigen sau anticorp din materialul de testat este determinată folosind un grafic de calibrare.
DISPOZIȚII GENERALE
Metoda ELISA cuprinde 3 etape principale: 1) formarea unui complex imun „antigen (substanță de testat) – anticorp specific acestuia” sau invers; 2) formarea unei legături conjugate cu complexul imun format în stadiul anterior sau cu situsuri de legare libere (determinanți); 3) transformarea substratului sub acțiunea unei etichete enzimatice într-un semnal înregistrat ca urmare a unei reacții biochimice.
Toate tehnicile ELISA sunt clasificate ca omogene sau eterogene.
Metodele în care toate cele 3 etape ale ELISA au loc în soluție, iar între etapele principale nu există etape suplimentare de separare a complexelor imune formate de componentele nereacționate, aparțin grupului de metode ELISA omogene. ELISA omogen, care este de obicei utilizat pentru determinarea substanțelor cu greutate moleculară mică, se bazează pe procesul de inhibare a activității unei enzime atunci când este combinată cu un antigen sau anticorp. Ca rezultat al reacției antigen-anticorp, activitatea enzimei este restabilită. În timpul formării unui complex imun antigen-anticorp care conține o etichetă enzimatică, activitatea enzimatică este inhibată cu 95% în raport cu substratul cu greutate moleculară mare, ceea ce se datorează excluderii sterice a substratului din centrul activ al enzimă. Pe măsură ce concentrația de antigen crește, din ce în ce mai mulți anticorpi se leagă și din ce în ce mai mulți conjugați antigen-enzimă liberi sunt reținuți, care sunt capabili să hidrolice un substrat cu greutate moleculară mare. Metoda ELISA omogenă se realizează foarte rapid. Analiza unei definiții durează 1 min. Sensibilitatea metodei este destul de mare. Cu ajutorul acestuia, puteți determina substanța la nivelul picomolelor.
Pentru metodele eterogene, este caracteristic să se efectueze o analiză într-un sistem în două faze cu participarea unei faze solide - un purtător și etapa de separare a complexelor imune de componentele nereacționate (spălare), care se află în faze diferite ( complexele imune formate sunt pe fază solidă, iar complexele nereacționate sunt în soluție). Metodele eterogene, în care formarea complexelor imune în prima etapă are loc pe o fază solidă, se numesc metode în fază solidă.
Metodele sunt clasificate ca omogene-eterogene dacă etapa 1 - formarea complexelor specifice - are loc în soluție, iar apoi se folosește o fază solidă cu un reactiv imobilizat pentru a separa componentele.
Metoda ELISA eterogenă constă din 3 etape principale:
- imobilizarea antigenului sau a anticorpului pe o fază solidă, complexul rezultat se numește imunosorbent;
- îndepărtarea reactivului nelegat și blocarea situsurilor de legare pe un suport solid folosind proteine de blocare cum ar fi albumina, cazeina; incubarea preparatului analizat cu imunosorbentul pentru a se lega;
3) detecție datorită activității enzimatice a substanței investigate în sine sau datorită etichetei enzimatice asociate preparatului analizat (versiunea directă). În unele cazuri, se realizează incubarea suplimentară a complexului „imunosorbent – substanță de testat” cu anticorpi secundari conjugați la o etichetă enzimatică (versiunea indirectă).
Cuantificarea analitului se realizează prin adăugarea unui substrat adecvat pentru detectorul utilizat și comparând semnalul analitului cu o probă standard.
Metoda ELISA eterogenă este împărțită în ELISA necompetitiv și ELISA competitiv. Schemele de analiză pot fi modificate în timpul dezvoltării unui medicament în conformitate cu cerințele necesare. Modificările ar trebui să fie indicate în monografie sau în documentația de reglementare. Alegerea metodei ELISA depinde de natura substanței de testat și de cantitatea acesteia, deoarece diferitele tipuri de ELISA au sensibilități diferite. Pentru a evalua calitatea substanțelor care conțin anticorpi, este posibil să se utilizeze anticorpi anti-idiotipici specifici.
Metoda ELISA necompetitivă
Metoda ELISA necompetitivă se împarte în mai multe tipuri după tipul de detecție (competitiv direct, competitiv indirect (indirect)) și după tipul de substanță imobilizată pe faza solidă (antigen sau anticorp).
ELISA directă
Se poate face în 2 moduri. În primul caz, substanța de testat (antigenul) este imobilizat direct pe faza solidă; atunci anticorpul marcat legat de antigen este detectorul. La efectuarea testului într-un mod diferit se folosesc anticorpi imobilizați pe faza solidă. În acest caz, detectorul este analitul marcat cu enzima.
Versiune ELISA indirectă (indirectă).
La efectuarea unei versiuni indirecte de ELISA, antigenul este imobilizat pe faza solidă. După blocare, la antigen se adaugă o soluție de anticorpi specifici acestuia. După incubare, complexul antigen-anticorp format este spălat de anticorpii nelegați și se adaugă o anti-imunoglobulină (anti-Ig) marcată cu enzimă, care acționează ca un detector. Detectoarele anti-Ig sunt disponibile comercial pentru clase și subclase de Ig specifice, ceea ce face ca acest format de analiză să fie convenabil pentru izotiparea anticorpilor. În plus, utilizarea anti-Ig marcată îmbunătățește semnalul în comparație cu ELISA directă, crescând astfel sensibilitatea testului.
Metoda „sandwich” ca variantă a ELISA
Cea mai comună metodă necompetitivă este metoda sandwich. Când se efectuează pe faza solidă, anticorpii primari sunt imobilizați cu blocarea lor ulterioară. Apoi se adaugă substanța de testat care conține antigenul și se incubează. După incubare, complexul antigen-anticorp este spălat de antigenul nelegat și se adaugă anticorpi secundari marcați cu o enzimă și se efectuează detectarea.
ELISA competitivă
Metoda ELISA competitivă se împarte în mai multe tipuri: după tipul de detecție (competitiv direct, competitiv indirect (indirect)) și după tipul de substanță imobilizată pe faza solidă (antigen sau anticorp).
ELISA competitivă directă
Pentru detectarea sau determinarea cantitativă a antigenelor solubile, se utilizează o variantă ELISA competitivă directă cu un antigen imobilizat pe o fază solidă. Pentru a face acest lucru, utilizați anticorpi specifici antigenului conjugați cu un detector adecvat (de exemplu, peroxidază de hrean, fosfatază alcalină, ruteniu sau fluoresceină). Un antigen standard este imobilizat pe faza solidă, urmat de blocare. Anticorpul conjugat marcat cu enzima este incubat cu substanța de testat (antigen solubil). Apoi acest amestec este adăugat la antigenul imobilizat, incubat și apoi spălat din complexul antigen-anticorp nelegat. Următorul pas este adăugarea unui substrat adecvat pentru enzima care urmează să fie utilizată ca etichetă. Inhibarea reacției datorită prezenței a 2 antigene în sistem, în comparație cu proba martor fără un antigen solubil competitiv, este invers proporțională cu valoarea cantității de substanță de testat.
ELISA competitiv direct cu un anticorp imobilizat pe o fază solidă este similar cu un ELISA competitiv direct cu un antigen imobilizat pe o fază solidă, cu toate acestea, este utilizat pentru a detecta sau cuantifica anticorpii.
ELISA competitiv indirect (indirect).
Această metodă ELISA este similară cu varianta competitivă directă, cu toate acestea, în loc de un anticorp sau antigen marcat, pentru detectare sunt utilizați un reactiv anti-Ig marcat sau, respectiv, anticorpi secundari marcați.
Condiții generale pentru metodăELISA
Ca fază solidă pentru imunotestul enzimatic sunt utilizate diferite materiale: silicon, nitroceluloză, poliamide, polistiren, clorură de polivinil, polipropilenă, acril și altele. Faza solidă poate fi pereții unei eprubete, 96 de godeuri și alte plăci, margele, margele, precum și nitroceluloză și alte membrane care absorb activ proteinele. Principiul imobilizării (interacțiune hidrofobă, hidrofilă, covalentă) depinde de alegerea fazei solide. Faza solidă cel mai frecvent utilizată sunt plăcile de microtitrare din plastic cu 96 de godeuri. Numărul de godeuri din placă poate varia. Placa poate fi transparentă (detecție colorimetrică) și opac (detecție chemiluminiscentă, fluorimetrie).
Imobilizarea trebuie efectuată fără bule de aer în puț, deoarece prezența acestora modifică citirea densității optice. Este posibil să se utilizeze reactivi imobilizați biotinilați. În acest caz, în reacție se utilizează streptavidină și o etichetă enzimatică biotinilată. Această metodă este folosită pentru amplificarea semnalului. Timpul și temperatura de imobilizare, în funcție de natura cinetică, stabilitatea și concentrația reactivului, trebuie specificate în monografie și documentația de reglementare.
Toate etapele testului imunosorbant legat de enzime, soluțiile de spălare și blocare, intervalele de timp și condițiile de temperatură pentru fiecare etapă, numărul de rotații pe minut pentru incubarea pe un agitator, condițiile de detectare ar trebui, de asemenea, specificate în monografie și în documentația de reglementare.
Exemple de metode pentru unele tipuri de ELISA
Metoda ELISA indirectă necompetitivă
- Absorbția antigenului. Se adaugă 0,1-0,5 μg de antigen și 100 μl de soluție tampon carbonat-bicarbonat 0,05 M (pH 9,6) în fiecare godeu al unei plăci cu 96 de godeuri, cu excepția cazului în care se indică altfel în monografie sau în documentația de reglementare, apoi se efectuează sorbția la un temperatura de 4 О С timp de 16 ore.Este posibil sa se utilizeze si alte solutii tampon cu valori ridicate ale pH-ului. Incubarea se efectuează cu agitare pe un agitator cu plăci orizontale.
Spălarea (de două ori) a moleculelor de antigen nelegat se efectuează cu soluție salină tamponată cu fosfat (pH 9,0) care conține 0,1% tween-20 (300 μl per godeu), dacă nu se indică altfel în monografie sau în documentația de reglementare.
- Blocare. Pentru a bloca locurile de legare nespecifică a antigenelor sau anticorpilor, godeurile plăcii sunt umplute cu soluție salină tamponată cu fosfat (pH 9,0) sau cu altă soluție tampon specificată în Monografia Farmacopeei sau în documentația de reglementare care conține 1% soluție de albumină serică bovină. sau alte proteine (cazeină, gelatină, lapte praf etc.) și incubate timp de 10-15 minute la temperatura camerei (dacă nu se indică altfel în monografie sau în documentația de reglementare).
III. Titrarea anticorpilor specifici. Dacă este necesară o evaluare cantitativă, substanța de testat (antigen sau anticorp) este titrată în diluții în serie în paralel cu proba standard (SS).
Titrarea poate fi efectuată atât pe rândurile orizontale, cât și pe cele verticale ale plăcii. Trebuie remarcat faptul că titrarea anticorpilor se efectuează în cazul în care este necesară selectarea concentrației optime de anticorpi sau determinarea titrului acestora. In cazul in care se determina concentratia optima si/sau titrul de anticorpi, atunci se foloseste dilutia recomandata pentru acesti anticorpi (ser).
În timpul titrarii, o diluție gata preparată a anticorpilor este introdusă în primul godeu dintr-un rând - în medie, 1-10 μg per godeu, apoi se efectuează o diluție secvenţială a anticorpilor în godeuri. Incubarea cu anticorpi specifici se efectuează timp de 30 de minute la temperatura camerei cu agitare pe un agitator cu plăci orizontale.
Spălarea se efectuează de cel puțin 3-4 ori folosind o soluție tampon fosfat-salină pH 9,0 care conține 0,1% Tween-20.
- Adăugarea de anticorpi anti-specie (antiglobulină) conjugați cu o etichetă enzimatică. Anticorpii policlonali anti-specie conjugați cu o etichetă enzimatică sunt utilizați ca anticorpi detectori (secundari). Cei mai frecvent utilizați sunt anticorpii de capră sau de iepure specifici întregii molecule sau fragmentelor Fc ale anticorpilor specifici. Concentrația de anticorpi detectori, de regulă, este indicată de producător ca o diluție a soluției stoc (de exemplu, 1: 1000).
Incubarea cu anticorpi secundari marcați se efectuează timp de 30 de minute la temperatura camerei cu agitare pe un agitator cu plăci orizontale.
Spălarea se efectuează de cel puțin 3-4 ori folosind o soluție tampon fosfat-salină (pH 9,0) care conține 0,1% Tween-20.
Incubarea se efectuează timp de 10 minute la temperatura camerei și se agită pe un agitator cu plăci orizontale.
- În godeuri se adaugă 100 μl de soluție de substrat și se incubează timp de 10 minute la temperatura camerei și cu agitare constantă. Pentru a opri reacția enzimatică, se folosește un „reactiv de oprire”, care este adăugat la toate probele de testare și de control în cantități egale. Acidul sulfuric este cel mai adesea folosit ca „reactiv de oprire”.
Direct necompetitiv Metoda ELISA
Tehnica ELISA directă are doar mici diferențe față de tehnica ELISA indirectă necompetitivă. Deci, etapele I și II sunt aceleași în ambele tipuri de analiză. Diferența constă în faptul că în versiunea directă a ELISA în stadiul III sunt utilizați anticorpi specifici antigenului studiat, conjugați cu o etichetă enzimatică, care interacționează direct cu substanța de testat. Dacă este necesar, puteți titra conjugații în același mod ca cel descris anterior pentru anticorpii neconjugați. Etapa IV în cadrul ELISA direct necompetitiv nu este efectuată.
Metoda sandwich ELISA
În această versiune ELISA, se utilizează o pereche de anticorpi (primari și secundari) specifici epitopilor la distanță spațială ai antigenului studiat.
- Absorbția anticorpilor pe faza solidă. Tehnica de sorbție a antigenului este similară cu tehnica de sorbție a anticorpilor din secțiunea „Metoda ELISA indirectă necompetitivă”.
- Blocare. Metoda de blocare a locurilor de legare nespecifice pe substrat (fază solidă) este similară cu metoda de blocare descrisă în secțiunea „Metoda ELISA indirectă necompetitivă”.
III. Incubarea antigenului.În godeurile plăcii cu anticorpi preadsorbiți, se adaugă 50 μl de substanță de testat și diluții standard ale antigenului, dacă nu se indică altfel în monografie sau în documentația de reglementare. Diluțiile antigenului trebuie preparate pe baza de soluție salină tamponată cu fosfat (pH 9,0) care conține 0,1% Tween-20, deoarece Tween-20 reduce legarea nespecifică a moleculelor de proteine între ele și la suprafața plăcii. Atât substanța de testat, cât și diluțiile standard de antigen sunt introduse în perechi în godeuri adiacente într-un rând orizontal (sau 3 replici), folosind 2 (3) godeuri pentru fiecare diluție de proteine.
Incubarea se efectuează la temperatura camerei timp de 30 de minute cu agitare constantă. Spălarea se efectuează de cel puțin 3-4 ori cu soluție tampon fosfat-salină (pH 9,0) care conține 0,1% tween-20, sau altă soluție tampon specificată în monografie sau documentele de reglementare.
- Incubarea cu anticorpi legați de enzime.În godeurile plăcii se adaugă 100 μl dintr-o soluție de anticorpi specifici conjugați cu o etichetă enzimatică. Concentrația optimă de anticorpi conjugați, de regulă, este indicată în monografie sau în documentația de reglementare (de obicei se utilizează o concentrație de 2-4 μg / ml).
Incubarea cu anticorpi marcați cu enzimă se efectuează timp de 30 de minute la temperatura camerei cu agitare pe un agitator cu plăci orizontale.
Spălarea se efectuează de cel puțin 3-4 ori folosind o soluție tampon fosfat-salină (pH 9,0) care conține 0,1% tween-20 sau o altă soluție tampon specificată în monografie sau documentele de reglementare.
- Efectuarea unei reacții enzimatice, însoțită de apariția unui produs colorat. Metoda de realizare a reacției enzimatice este similară cu metoda descrisă în secțiunea: „Metoda ELISA indirectă necompetitivă”.
Detectare
După cum sa menționat mai sus, anticorpii marcați cu o etichetă enzimatică sau alt reactiv sunt utilizați pentru detectare. Marcajul enzimatic poate fi, de exemplu, peroxidază de hrean, fosfatază alcalină sau galactozidază. Anticorpii sau antigenii cu alte etichete pot fi utilizați ca detector. Alegerea unui reactiv detector depinde de tipul de marcaj conjugat cu anticorpul sau antigenul și metoda de detectare.
Spectrofotometria, chemiluminiscența, fluorimetria și alte metode pot fi utilizate ca metode de detectare pe baza alegerii etichetei.
Rezultate ELISA cantitative
Rezultatele metodei ELISA cantitative sunt calculate dintr-o curbă de calibrare cu regresie liniară inversă sau printr-o metodă complexă folosind o curbă de calibrare cu regresie inversă neliniară. Metoda de interpretare a rezultatelor depinde de metoda ELISA utilizată. De exemplu, din rezultatele testului, curba de calibrare poate fi utilizată pentru a estima concentrația unei probe necunoscute, pentru a estima jumătatea concentrației maxime de inhibiție sau concentrația efectivă. Acest lucru vă permite să determinați cantitatea de analit sau activitatea acestuia în comparație cu o probă standard de referință / calibrare (SS). De obicei, forma curbei de calibrare la efectuarea unei metode ELISA cantitative, care caracterizează concentrația medicamentului analizat, depinde de valoarea medie calculată neliniar. În acest sens, se recomandă utilizarea diferitelor modele matematice pentru a analiza curba rezultată. În alte cazuri, metoda ELISA este utilizată ca metodă calitativă care vă permite să evaluați prezența unei anumite substanțe de testat într-o probă în limitele sensibilității tehnicii.
Notă.
Prepararea soluției tampon carbonat-bicarbonat (pH 9,6). Într-un cilindru dozator cu o capacitate de 1000 ml se adaugă 1,59 g carbonat de sodiu (anhidru) sau 4,29 g carbonat de sodiu 10-apos și 2,93 g bicarbonat de sodiu, se dizolvă în 800 ml apă purificată, se aduce pH-ul la 9,6, se amestecă , apoi aduceți volumul soluției la semn cu apă purificată și amestecați din nou.
Pentru o muncă și o dezvoltare eficientă, angajații au nevoie de informații despre acțiunile care au succes și ce trebuie schimbate. Prin urmare, în pregătirea managerială, managerii învață metode de feedback de la subordonați. Una dintre cele mai frecvente este metoda sandwich. Liderii sunt învățați să recunoască mai întâi aspectele pozitive despre munca angajatului (Lauda # 1), apoi să critice și apoi să laude din nou, încheind conversația pe o notă pozitivă (Lauda # 2). „Umplutura” — critica — este cuibărată între două chifle de laudă. Laudele inițiale sunt necesare pentru a construi contactul, pentru a construi încrederea și pentru a reduce vigilența și rezistența angajaților. Următoarele critici ajută la îmbunătățirea rezultatelor. Și laudele de la sfârșit ar trebui să netezeze gustul neplăcut al criticii. Așa ar trebui să funcționeze teoretic acest „fast-food”.
Descoperirile cercetărilor contrazic eficacitatea metodei sandwich și, chiar mai rău, sugerează efecte secundare negative. Cercetătorii au întrebat angajații cum preferă să primească feedback. Iar oamenii au fost unanimi în favoarea ca critica și laudele să nu fie amestecate într-o singură conversație, ci să fie auzite separat. Angajații care primesc în mod regulat „sandvișuri” încep să vadă orice comentarii pozitive din partea managerului lor ca fiind nesincere. La urma urmei, ei știu că, după laude, ceea ce liderul a vrut cu adevărat să spună va suna cu siguranță - critică. Dar efectul criticii este, de asemenea, redus și adesea dispar complet din cauza laudei nr. 2. Toată lumea crede că managerul nu a vrut să spună serios că, de exemplu, întârzierea este inacceptabilă, deoarece a lăudat angajatul la sfârșitul conversației. . Se știe că oamenii își amintesc cel mai bine ideile la începutul și la sfârșitul unei conversații.
Mulți directori nu folosesc metoda sandwich deoarece este eficientă. Este mai ușor să începi o conversație dificilă nu cu cuvinte neplăcute, ci cu cuvinte pozitive. Dar cu cât sunt mai lungi discursurile introductive laudative, cu atât este mai dificil pentru lider să se îndrepte spre critică.
Pentru ca feedback-ul să fie eficient, liderul trebuie să rezolve două probleme secvenţial.
Construiți o relație în care angajatul să nu fie indiferent la feedback-ul superiorilor. Această relație se bazează fie pe încredere, fie pe frică. Un angajat va avea încredere în feedback-ul managerului dacă crede că managerul dorește sincer să-i ajute pe subalterni, și nu doar se afirmă și dacă consideră că managerul este informat și competent în problema în discuție.
Or, relația poate fi construită pe frică, atunci când angajatului îi este frică să înșele așteptările managerului. Dar pentru aceasta, angajatul trebuie să știe că liderul are puterea reală de a recompensa sau de a pedepsi. Subordonații trebuie să se asigure că nu pot ascunde de superiori munca prost prestată și că pedeapsa (sau, mai rar, o recompensă) va fi inevitabilă.
Cu toate acestea, o astfel de relație între un angajat și un manager poate fi construită (sau distrusă) pe toată durata colaborării, și nu într-o singură conversație. Și încercarea de a construi instantaneu încredere cu laudele # 1 este naivă.
Influențați acțiunile angajaților cu feedback. Cum să o faci corect din punct de vedere al științei? Timpul de feedback, intervalul minim dintre un eveniment și feedback-ul (conversația) ulterior este unul dintre principalii factori de succes. Prin urmare, procedurile anuale de inventariere sunt rareori utile pentru îmbunătățirea rezultatelor. Feedback-ul frecvent, aproape online, va avea un efect mult mai mare.
Dacă angajatul se comportă deja corect, acesta poate fi susținut de laude. Dar progresele și promisiunile care încurajează angajații să răspundă în mod corespunzător nu funcționează. Să presupunem că managerul a observat că angajatul își ia concediu de la serviciu. Bonusul promis pentru munca șoc nu va face decât să întărească dorința angajatului de a continua să nu facă nimic. Prin urmare, trebuie mai întâi să realizați o muncă conștiincioasă și abia apoi să sărbătoriți cu laude adevăratele sale succese.
Comportamentul nedorit poate fi corectat cu critici constructive, dar ar trebui să fie legat de momentul în care evenimentul este discutat. Pedepsirea unui angajat după fapt, când a dejucat deja toate termenele, nu va ajuta la corectarea situației. Iar critica nu trebuie confundată cu amenințările. De exemplu, o promisiune de a concedia un angajat dacă acesta continuă să-și ia concediu de la serviciu nu va face decât să-l determine pe angajat să evite contactul cu managerul, dar nu va începe să aibă performanțe mai bune.
Dacă liderul a construit deja o relație de încredere și laudă și critică subalternii cu o dorință sinceră de a ajuta, ar trebui să facă acest lucru fără pauze, cât mai repede posibil și, de asemenea, să-și exprime gândurile într-o manieră concretă și constructivă.
Problema este că întotdeauna vor exista angajați care nu sunt pregătiți să audă comentariile managerului și să-și corecteze acțiunile. Motivul este că experiențele lor cu oameni puternici - părinți, profesori, șefi anteriori - au fost negative și uneori traumatizante. Și acest scepticism se poate răspândi și la tine. Calea ușoară este să scapi de angajatul cu probleme. Dar va fi mai util dacă îți faci timp pentru a construi relații de încredere și a lăuda angajatul în acele situații aparent nesemnificative în care a auzit și a ținut cont de dorințele tale. Și atunci chiar și un angajat aparent incorigibil vă poate surprinde în mod plăcut.
